本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被地塞米松抗原,樣本中地塞米松和此抗原競爭抗地塞米松抗體(抗試劑), 加入酶標(biāo)二抗(酶標(biāo)物)與抗地塞米松抗體相結(jié)合,經(jīng)TMB底物顯色,樣本吸光值與地塞米松含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣本中地塞米松的含量。
適用范圍?
可定性、定量檢測生鮮奶、成品純牛奶、發(fā)酵乳、乳飲料等樣本中地塞米松的含量。
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25°C)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。?
2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放進(jìn)原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于2~8°C。切勿冷凍。?
3、洗滌液在使用前也需回溫。
4、編號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。?
5 ?加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本:加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本100μL到對(duì)應(yīng)的微孔中,再加入地塞米松酶標(biāo)物50μL/孔,再加入地塞米松抗試劑50μL/孔輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)30min。?
6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液250μL/孔,充分洗滌5次,每次間隔10s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。?
7、顯色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)15min。
8、測定:加入終止液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長450/630nm檢測,請(qǐng)?jiān)?min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測定每孔OD值。 結(jié)果判定
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