本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被喹諾酮類抗原,樣本中殘留的喹諾酮類藥物和微孔上預(yù)包被的抗原競(jìng)爭(zhēng)喹諾酮類抗體(抗試劑),加入酶標(biāo)二抗(酶標(biāo)物)后,經(jīng)TMB底物顯色,樣本的吸光值與其殘留物喹諾酮類藥物的含量呈負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣本中殘留物喹諾酮類藥物的含量。
適用范圍
可定性、定量檢測(cè)蜂蜜、牛奶、奶粉等樣品中喹諾酮類藥物的殘留量。
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25°C)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均需輕輕搖勻。?
2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放進(jìn)原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于2~8°C。切勿冷凍。?
3、洗滌工作液在使用前也需回溫。?
4、編號(hào):將樣品和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣品和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣品孔所在的位置。?
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品:加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50μL/孔到對(duì)應(yīng)的微孔中,再加入喹諾酮類酶標(biāo)物50μL/孔,再加入喹諾酮類的抗試劑50μL /孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)30min。?
6、洗板:小心揭開(kāi)蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液250μL/孔,充分洗滌4~5次,每次間隔10~20s,用吸水紙拍干(拍干后若有氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破)。?
7、顯色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)15min。?
8、測(cè)定:加入終止液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè),請(qǐng)?jiān)?min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測(cè)定每孔OD值。
?結(jié)果判定
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