本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)而成的檢測產(chǎn)品,與儀器分析技術(shù)相比,具有快速、簡便、準確和靈敏度高等優(yōu)點,操作時間為45min,能減少操作誤差和工作強度。
試驗原理
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在酶標板微孔條上預包被四環(huán)素類藥物抗原,樣本殘留的四環(huán)素類藥物和微孔條上預包被的抗原競爭抗四環(huán)素類藥物抗體(抗試劑),加入酶標二抗(酶標物),經(jīng)TMB底物顯色,樣本吸光度值與其殘留物四環(huán)素類藥物呈負相關(guān),與標準曲線比較再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣品中四環(huán)素類藥物的含量。
適用范圍
可定性、定量檢測蜂蜜、牛奶中四環(huán)素、土霉素、金霉素、強力霉素等四環(huán)素類藥物的含量。
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25°C)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。若試劑中有晶體析出,回溫溶解后方可使用。
2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔放入錫箔袋,保存于2~8°C。切勿冷凍。
3、洗滌工作液在使用前也需回溫。
4、編號:將樣本和標準品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
5、加標準品/樣本:加標準品/樣本100μL到對應(yīng)的微孔中,再加入四環(huán)素類酶標物50μL/孔,再加入四環(huán)素類抗試劑50μL/孔輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)30min。
6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液250μL/孔,充分洗滌4~5次,每次間隔10s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。
7、顯色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境反應(yīng)15min。
8、測定:加入終止液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標儀于450nm處(建議用雙波長450/630nm檢測,請在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測定每孔OD值。
結(jié)果判定
請利用試劑盒專業(yè)分析軟件進行計算,更便于大量樣本的準確、快速分析(歡迎來電索取)。