本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)的藥物殘留檢測(cè)產(chǎn)品,與儀器分析技術(shù)相比具有快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確和靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),操作時(shí)間僅需25分鐘,能減少工作強(qiáng)度和操作誤差。?
實(shí)驗(yàn)原理?
本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被甲砜霉素抗原,樣本殘留的甲砜霉素和微孔上預(yù)包被的抗原競(jìng)爭(zhēng)甲砜霉素抗體(抗試劑),同時(shí)甲砜霉素抗體與酶標(biāo)二抗(酶標(biāo)物)相結(jié)合,經(jīng)TMB底物顯色,樣本吸光值與其殘留物甲砜霉素呈負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣本中甲砜霉素的含量。?
適用范圍?
可定性、定量檢測(cè)生鮮奶樣本中甲砜霉素的殘留量。
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25°C)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。?
2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔放入錫箔袋,保存于2~8°C。?
3、洗滌液在使用前也需回溫。
4、編號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。?
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本:加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本30μL到對(duì)應(yīng)的微孔中,加入甲砜霉素酶標(biāo)物50μL/孔,然后加入甲砜霉素抗試劑70μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)15min。?
6、洗板:小心揭開(kāi)蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液250μL/孔,充分洗滌5次,每次間隔30s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破)。?
7、顯色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)10min。?
8、測(cè)定:加入終止液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè),請(qǐng)?jiān)?min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測(cè)定每孔OD值。?
?結(jié)果判定?
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