產(chǎn)品介紹
概述
本試劑盒是應用ELISA技術研發(fā)而成的檢測產(chǎn)品，具有快速、簡便、準確和靈敏度高等優(yōu)點，操作時間需45min，能減少操作誤差和工作強度。
檢測步驟
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20~25℃）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。若試劑中有晶體析出，回溫溶解后方可使用。
2、取出需要數(shù)量的微孔板，將不用的微孔放入錫箔袋，保存于2~8℃。
3、洗滌液【配液1】在使用前也需回溫。
4、編號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
5、加標準品/樣本：加標準品或樣本100μL/孔到對應的微孔中，然后加入四環(huán)素類酶標物50μL/孔，再加入四環(huán)素類抗試劑50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置于25℃避光環(huán)境中反應30min。
6、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌液【配液1】250μL/孔，充分洗滌4~5次，每次間隔10s，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。
7、顯色：加入底物液A液50μL/孔，再加底物液B液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置于25℃避光環(huán)境反應15min。
8、測定：加入終止液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，設定酶標儀于450nm處（建議用雙波長450/630nm檢測，請在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)），測定每孔OD值。（若無酶標儀，則不加終止液用目測法可進行判定）。
注意事項
1、室溫低于 20℃或試劑及樣本沒有回到室溫（20～25℃），會導致所有標準的 OD 值偏低。
2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會出現(xiàn)標準曲線不成線性，重復性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
3、每加一種試劑前需將其搖勻。
4、反應終止液為 2M 硫酸，避免接觸皮膚。
5、不要使用過了有效日期的試劑盒，也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑；摻雜使用過了有效期的試劑盒會導致靈敏度降低；不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6、儲存條件保存試劑盒于 2～8℃，切勿冷凍，將不用的酶標板微孔板放進錫箔袋重新密封。標準物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
7、試劑變質(zhì)的跡象發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì)，應當棄之。0 標準的吸光度（450/630nm）值小于 0.5（A450nm<0.5）時，表示試劑可能變質(zhì)。
8、在加入底物液A 液和底物液 B 液后，一般顯色時間為15min。若顏色較淺，可延長反應時間到 20min，但不得超過 20min。反之，則減短反應時間。
9、濃縮洗滌液如有結(jié)晶屬正常現(xiàn)象，請加熱溶解后使用。
10、該試劑盒最佳反應溫度為 25℃，溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
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