磺胺類(SAs)藥物在水產(chǎn)畜禽養(yǎng)殖中應(yīng)用十分廣泛,主要在動物疾病防治方面有顯著的療效,但與此同時,這類藥物顯著的毒副作用也引起了人們的廣泛關(guān)注。例如:影響泌尿系統(tǒng)功能,引起結(jié)晶尿,血尿等反應(yīng)及致癌性。因此國內(nèi)外對動物性食品中磺胺類藥物以及單一磺胺藥物的殘留限量都做出了相應(yīng)的規(guī)定。
本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)的藥物殘留檢測產(chǎn)品,具有快速、簡便和靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),操作時間需45min,能減少檢測時間和操作誤差。
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25℃)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放進(jìn)原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于2~8℃。切勿冷凍。
3、洗滌液【配液1】在使用前也需回溫。
4、編號:將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本:加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50μL/孔到對應(yīng)的微孔中,再加入磺胺類多殘留酶標(biāo)物50μL/孔,再加入磺胺類多殘留抗試劑50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置于25℃???避光環(huán)境中反應(yīng)30min。
6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液【配液1】250μL/孔,充分洗滌4~5次,每次間隔10s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。
7、顯色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置于25℃避光環(huán)境中反應(yīng)15min。
8、測定:加入終止液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長450/630nm檢測,請在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測定每孔OD值(若無酶標(biāo)儀,則不加終
止液用目測法可進(jìn)行判定)。